流程：1)麻醉2)开胸3)心脏解剖4)生理盐水冲水5)4%多基甲醛固定6)取脑7)保存或切片. 

1多聚甲醛的配置： 

一般方法为：4％多聚甲醛PBS缓冲液配法：称取40gPFA溶于装有800ml PBS的玻璃容器（烧杯或烧瓶）中,持续加热磁力搅拌至60～65℃,使成乳白色悬液.用1.0mol/L的NaOH值至7.0,使呈清亮状（滴加）,过滤后定容至1000ml,室温或4℃保存备用. 

2实验准备：准备两个10ml注射器,剪刀,弯镊、PBS 10ml/只、4%PFA 10ml/只. 

3麻醉后开胸：因老鼠较小,可冰冻麻醉,或者用致死量麻醉.沿肋弓下向左右剪开,至双侧腋中线向上剪开,然后向上翻起胸壁,充分暴露心脏. 

4心脏穿刺：在右心耳处用针扎出一个小孔,用装有PBS针筒在左心室进行穿刺. 

5灌流：缓慢灌注PBS 10ml,见到老鼠两前肢及两肺变白可改灌注多聚甲醛,多聚甲醛的灌流也同PBS. 

6灌注成功的标志：刚开始灌注时老鼠剧烈抽动；成功后老鼠后肢绷直,尾部竖起成一直线；所灌注的脑组织白而硬. 

7取脑：分离除去后颈部肌肉,用弯镊小心取出脑组织. 

8后固定：灌流后的脑组织置于4％PFA置4度冰箱内进行后固定,时间>2h,过夜最好. 

优点：可用单人用注射器直接完成,不用输液管架,而且平均每只仅需5～10ml固定液,时间也仅为5～10min.